介绍IVF中培养液的使用方法和胚胎培养

IVF主要由三个步骤组成：

1、促性腺技术促进卵泡发育与促排卵

2、体外授精和胚胎培养

3、胚胎移植。每一步之间都息息相关，相辅相成。其中体外受精与胚胎培养是在IVF实验室进行，从准备培养液可以到胚胎移植和冷冻一般需要4-8天的时间，

这里以序列培养为例简要概括地介绍培养液的使用方法和胚胎培养。

前一天：取卵前一天，准备体外受精培养液。一般用受精液加5mg/mlHSA，也可以使用10mg/mlHSA.如果用液滴形式培养，培养皿中可放入多滴培养液加油覆盖，将培养皿放入培养箱过夜平衡。

取卵天：取卵当天，将卵细胞复合物放入液滴，取卵后4~6小时加入精子，精子数根据精子质量以及活力而定，如果是单精子注射，按照单精子注射程序操作。准备下一天用的培养液：用另培养皿准备含有5mg/mlHSA的胚胎培养液，放入培养液中过夜平衡，如果不是HSA而是用其他蛋白质添加物，按照说明和指导手册操作。

第一天：卵细胞与精子混合后或单精子注射后16~18小时，在显微镜下检查受精状态，受精的卵细胞有合子形成，转移合子到前一天准备的胚泡培养液中，放回培养箱继续培养。

第二天：观察胚泡分裂与发育状态以及形态学评定。质量好的胚胎应在4细胞阶段，细胞大小均匀一致，没有或很少有碎片形成，也有实验室在这一天不动培养皿也不观察胚胎，任其生长发育。

如果是计划第三天做胚胎移植以及冷冻，准备如下培养液：1 准备冷冻培养液 2准备移植培养液(用哪一种培养液以及加入的蛋白溶度由实验室自定，各实验室在这一步的差别很大)。