许多年轻夫妇还搞不清精液和精子的区别,他们很焦虑是不是性交以后的精液流出影响了受孕,他们想方设法,采取各种体位,想阻止精液流出阴道。在医生建议做宫腔内人工授精(IUI)治疗的时候,对于精液的处理,大多不孕夫妇很茫然,为什么精液要洗涤?注射到宫腔里和阴道里有不同吗?
在每个生殖中心都有这样一个部门和单元—— 人工授精治疗区,它由取精室、精子处理室、人工授精室等功能单位构成。这里有非常严格的管理制度和工作流程。丈夫们在医生通知的时间,进入取精室采集精液,有一个小窗口递进精子处理室,并核对指纹。精液在处理室经过近两个小时的操作,洗涤好的精子悬液被送进人工授精室,核对好姓名,注射进入妻子的子宫里,渴望精卵能够顺利遇见彼此,成就一个新的生命。
为什么要进行精子洗涤?
1677年,荷兰的显微镜学家列文虎克首次利用显微镜观察到了精子,正常成年男性每克睾丸组织每秒内可产生约300~600个精子,每天双侧睾丸可产生几千万至上亿个精子。人类精子的发生需要经过一系列复杂的过程,其时程约为70天左右。
1929年《新英格兰医学杂志》发表了关于精子计数可用于不育症诊断与判断预后及治疗的论文,开始了真正意义上的精液分析。在男性射出的正常的精液中,精子占5%,精浆占95%,精浆是由附性腺的分泌液组成:其60%来源于精囊腺液,30%来源于前列腺液,含液化因子、锌、枸橼酸和酸性磷酸酶等成分,少量来自尿道球腺液和附睾液等。精子与精浆就像鱼与水的关系。在自然受孕时精浆有助于精子顺利进入女性阴道,有助于精子穿透宫颈黏液,等精子进入子宫颈管后,精浆就流出体外。
在应用于宫腔内人工授精(IUI)或体外受精(IVF)等辅助生育技术都需要处理精液,去除精浆,规避了宫颈等自然屏障的阻扰。因为精浆并不是无菌的,不能进入非常洁净的女性子宫腔,而且精液中某些成分(如前列腺素、锌)可刺激子宫收缩,引起疼痛,所以我们要将精子从精液中分离出来,最终提纯和制备出的精子悬液,含高比例的、形态正常的、活动力强的精子,且没有碎片和其他细胞以及死精子,这样的精子就可以用在宫腔内人工授精和体外受精中了。
ART方案不同,精子需量身定做。
辅助生育技术中卵胞浆内单精子注射(ICSI)、体外受精(IVF) 、宫腔内人工受精(IUI)技术,对精子的数量和质量要求依治疗方案不同而异。
(1)ICSI技术是将一个精子注入一枚卵细胞质内的显微操作技术,对精子的数量要求最低,最低限度只要是有形态正常、活动的精子即可,属于“一见钟情”类,常应用于严重的少弱精症和受精障碍患者的治疗方法;
(2)IVF治疗方案中一枚卵子周围需要3~5万条精子拥簇才能正常受精,属于“众星拱月”类,常用于输卵管因素不孕;
(3)IUI治疗则需要至少一千万以上前向活动的精子,它们浩浩荡荡从子宫腔出发,激流勇进,跋山涉水,最终冠军精子在输卵管处寻觅到卵子妹妹的芳容,携手笑定终身,属于“鹊桥相会”类。
实验室精子洗涤方法种种。
精液是分成数段射出的,富含精子的前列腺液,位于射精过程的初始部分,后面则主要是精囊液。所以精液标本采集是否完整、前次禁欲时间长短、附性腺分泌量、近期患病情况(尤其是发热)、射精障碍、精神紧张等因素,都会对本次精液质量结果产生影响。
何种质量的精液标本,采用各种不同的精子洗涤方法,其产生的效果是不同的。实验室的精子制备方法目前常用的有以下几种:简单的洗涤、直接上游法和非连续密度梯度离心法,各种方法之间各有优缺点。
(1)“简单的洗涤法”,就是用培养液稀释精液标本,直接离心,收集沉淀的精子团,该方法可回收最多的精子,但夹杂死精子和其他细胞碎片;
(2)“直接上游法”,是根据精子的泳动能力选择精子。将培养液加到液化精液上方,也可以将精液加到培养液的下方,活动的精子会自动游泳到培养液里表面呼吸新鲜空气,将聚集在培养液表层上方的优质精子收集备用;
(3)“非连续密度梯度离心法”,将精液放置在不同密度梯度培养液的上方,在离心过程中由于密度不同而分离,常用上层40%和下层80%的密度梯度液,加上活动精子主动游动,穿过梯度液在离心管底形成一个松软的沉淀团,可获得部分活力很好的精子,且不含碎片、白细胞、非精子细胞和退化的生精细胞。
三种方法中“非连续密度梯度离心法”在活动精子的回收率上明显高于上游法,而且最终精子悬液中精浆成分污染也低于上游法。可用前列腺分泌的锌作为可溶性的精浆成分标志物,锌从精浆向上层上游液的扩散呈时间依赖性,上游法制备的精子悬液中锌的浓度比密度梯度法高。
在精子优化处理过程中,尽量选择处理时间短,离心力低,操作轻柔,以减少对精子的损伤。“许多精子洗涤液已经商品化,产品很多种,结果也更稳定。