概述囊胚培养的方法历程

随着人们对于胚胎发育的环境需求以及自身的代谢特征的认识不断深入，囊胚培养系统的发展经历了三个阶段：

1 单一的培养液培养法：这是最初的囊胚培养方法，从受精卵到囊胚阶段的胚胎都被培养在同一培养液中，这种培养系统的囊胚形成率和移植后的着床率都比较低。

2 共培养系统：以人输卵管上皮系统、颗粒细胞、子宫内膜细胞或非洲绿猴细胞等作为辅助细胞或者饲养细胞与人胚胎在体外共培养。这些辅助细胞释放出特异性促进胚胎生长的各种因子，同时除去培养液对于胚胎有害的成分，促进囊胚的发育，由于共培养系统制备复杂，成分不明确，应用的有效性也颇受争议，而且可能存在传播未知疾病的潜在风险，因此在IVF临床的推广应用大大受限。

3 序贯培养：近年来随着对胚胎生化环境认识的深入，囊胚培养进入了无细胞的阶段，研究发现，胚胎从受精卵至2-4细胞阶段，以消耗丙酮酸和乳酸为主，在无糖以及磷酸盐培养液中发育更好；卵裂球紧密化以后，其代谢模式由三羧酸循环转变为糖酵解，需要培养液中有足够的糖溶度。在此基础上，Garder等发展了G1、G2两种培养液的序贯培养系统。G1含有与输卵管液相同的细胞期胚胎的体外培养，G2中去除了抑制糖酵解的EDTA成分，增加糖类的含量与子宫相同，同时含有必需与非必需氨基酸和维生素等，从而满足8细胞-囊胚期胚胎生殖发育需求。