随着1986年首次使用冷冻卵子进行体外受精并成功妊娠后,卵子冷冻技术已在辅助生殖领域得到了越来越广泛的应用,并成为了生殖医学的研究热点,卵子冷冻的应用范围主要包括:1 因为卵巢早衰,恶性肿瘤的治疗等需要保持生育力的妇女 2 超排卵的患者取卵当日无法提供足够的精子 3 尽力卵子库的需要,使卵子捐赠安全可靠。 4避免胚胎冷冻所面临的法律、宗教、伦理问题。5为卵巢低反应患者累积卵子 6 减少辅助生殖技相关并发症。
不过由于卵母细胞体积大,所含水分多、膜的渗透性低,以及冷冻过程中冰晶的形成会对卵子产生损伤,而且纺锤体对温度敏感,可对染色体的重新排列产生影响,卵母细胞冻融复苏率较低,技术进展较为缓慢。
慢速冷冻是早期冷冻卵子的方法,需要自动化程序降温仪,至今,世界范围内仍然没有一个统一的卵母细胞慢速冷冻方法,但是经典的慢速冷冻方法,包括冷冻和解冻两个过程。
目前慢速冷冻常用的冷冻保护剂是丙二醇和蔗糖,复苏率约50%-90%,在不同的生殖中心慢速冷冻后的卵子复苏后的妊娠率也存在很大的差异,为了减少细胞内冰晶形成对于卵子可能造成的损伤,在冷冻液和解冻液中增加了蔗糖溶度,可提高卵子的冻融存活率和受精率,此外,延长卵子在平衡液中的额存留时间可以使得卵子充分脱水,在冷冻液中用胆碱取代钠可增加细胞膜的稳定,实现更好的冷冻复苏效果。